Se trata de un convento concepcionista, el segundo fundado en la ciudad y originado por la saturación del primero (el primero de esta serie). La Santísima, fue un convento destinado a criollas acaudaladas y fundado en 1618 y su lenta construcción culminó en 1675. Sus portadas son discretamente barrocas y en el nicho de la portada principal está una estatuilla de la Inmaculada Concepción en la llamada "piedra de Villerías". Cuenta con una sola nave, generosa en el espacio, con dos bóvedas de arista, bóvedas de lunetos y asimismo una cúpula, ésta sobre tambor y pechinas. La decoración es del estilo elegante y sobrio del periodo virreinal, consta de retablos neoclásicos y también de lienzos de asunto hagiográfico.

Fue fundado por tres capitanes de la familia Riviera Barrientos. En 1619 compraron al obispo Alonso de la Mota y Escobar el entonces palacio episcopal y construyeron allí un convento para sus hermanas e hijas “Clemencia de la Concepción y Constanza de San Miguel”. El convento fue consagrado en 1673 y dos siglos y medio después también sufrió las “Leyes de la Reforma”, se confiscaron sus bienes, se enclaustró a las religiosas y se fraccionó para ser vendido a particulares. Aún así la fachada se ha mantenido aunque con una importante reforma, se revistió en cantera en 1931 con motivo del cuarto centenario de la fundación de Puebla.